搜索

一看就会的质粒抽提实验步骤

栏目：技术服务 发布时间：2022-09-12
一看就会的质粒抽提实验步骤


实验原理

菌体在强碱性或者高温条件下裂解，释放出包括质粒在内的核酸，蛋白等物质。当 pH 恢复中性时，共价闭合环状质粒 DNA 复性快，而线性的染色体 DNA 复性缓慢，细菌蛋白质、破裂的细胞壁和变性的染色体 DNA会相互缠绕成大型复合物，而后者被十二烷基硫酸盐包盖。当用钾离子取代钠离子时，复合物会从溶液中有效地沉淀下来，离心除去变性剂后，就可以从上清中回收复性的质粒DNA。

碱裂解法：

煮沸法：

实验秘籍

对于实验老手来说，提质粒步骤已经烂熟于心，但对于实验小白的你，这份秘籍要收好了，有手就会！

 

经典碱裂解法实验步骤：


 

不同的下游实验，如质粒DNA疫苗、基因治疗、免疫增强剂、CAR-T及用于对细胞的基因工程改造生产重组蛋白等生物医药产品，对质粒的提取量和纯度也会有所差别。


上一篇： 2022年值得关注的七项技术
下一篇： 蔚来生物常规引物合成技术和服务优势
TOP
qrCode